Practica 3 "Digestión de la albúmina por pepsina industrial"

UNIVERSIDAD NACIONAL AUTÓNOMA DE MÉXICO

COLEGIO DE CIENCIAS Y HUMANIDADES

PLANTEL SUR

PRACTICA 3

“DIGESTION DE LA ALBUMINA POR PEPSINA INDUSTRIAL”

EQUIPO:

SERRATO MAGAÑA KARLA DENNISE

RUIZ TEMPLOS MARIANA

TERÁN HERNÁNDEZ PABLO ENRIQUE

PROFESORA: MARIA EUGENIA TOVAR

GRUPO:

528

Hipótesis:
En la practica observaremos la degradación de proteínas como la pepsina.
La digestión de las proteínas se inicia en el estómago gracias a la acción conjunta del ácido clorhídrico y de la pepsina.
La pepsina se encuentra en estado inactivo y el ácido clorhídrico ayudará a la activación de esta enzima.
La pepsina se produce en el estómago, actúa sobre las proteínas degradándolas (desdoblando las proteínas y péptidos), rompiendo los enlaces peptídicos y proporcionando polipeptídos.

Solo en el tubo con albúmina+pepsina+ácido clorhídrico ocurrirá una reacción, ya que la coenzima (ácido clorhídrico) activa la enzima ( pepsina) y así actúa sobre la proteína (Albúmina)

Preguntas generadoras:

• ¿Cómo actúa la pepsina sobre las proteínas?

actúa degradando las proteínas, rompiendo los enlaces peptídicos para así proporcionar polipéptidos.

• ¿Cómo están formadas las proteínas?

estan compuestas por aminoácidos de varios tipos unidos por enlaces peptídicos.

• ¿Qué es la pepsina?

es una enzima digestiva, que se forma por las células del estómago, cuya función es degradar las proteínas.

• ¿Cuál es el papel que desempeñan las proteínas del alimento, en los animales?

Desempeñan un papel muy importante en ellos ya que les proporciona energía, forma tejidos en ellos y sustancias de reserva.

• ¿Por qué es necesario que se digieran las proteínas del alimento?

Por que de no ser degradadas, no pueden ser absorbidas por las células, ya que son moléculas demaciado complejas para que nuestro organismo las pueda aprovechar.

• ¿Qué es la hidrólisis de una proteína?

Es la descomposición de las moléculas de una sustancia en agua. En la hidrólisis se rompen los enlaces peptídicos proporcionando los distintos aminoácidos que forman a la proteína.

• ¿Qué papel desempeña el ácido clorhídrico al actuar sobre la pepsina?

El ácido clorhídrico actúa como una coenzima, que activara la enzima de la pepsina.

Introducción:

El jugo gástrico, elaborado por las glandulas de la mucosa del estomago, contiene ácido clorhídrico libre y dos enzimas: quimosina y pepsina.En realidad ambas son secretadas como proenzimas inactivas y en presencia del ácido clorhídrico se transforman espontáneamente en enzimas activas.
pepsinogeno--------------ácido clorhídrico----------- pepsina

Objetivos:

• Identificar la acción de la pepsina sobre las proteínas
• Identificar los productos de la acción de la pepsina sobre las proteínas
• Comprender la acción de los jugos gástricos en la digestión química del alimento
• Conocer cómo se puede activar una enzima

Material:
1 vaso de precipitado de 1000 ml
Papel filtro
1 embudo
1 probeta de 100 ml
1 gradilla
4 tubos de ensayo
4 probetas de 10 ml
gasas


Material biológico:

Claras de huevo

Sustancias:

ácido clorhídrico 0.1 N
reactivo de Biuret
pepsina

Equipo:

1 balanza granataria electrónica
1 parrilla con agitador magnetico

Procedimiento:

Bate la clara de huevo cruda en un litro de agua fría, y llévala hasta la ebullición, sin dejar de batir. Filtrala. El líquido que se obtiene es una fina suspensión, muy estable, de albúmina desnaturalizada.
Prepara, por otro lado, jugo gástrico artificial, diluyendo en 100 ml, 1 g de jugo gástrico desecado, que venden en las farmacias bajo la denominación  de “pepsina”, nombre proviene de la enzima principal que contiene.
Prepara en cuatro tubos de ensayo las siguientes mezclas:
1 . 6 ml de albúmina + 6 ml de agua
2.  6 ml de albúmina + 1.5 ml de agua + 4.5 ml de HCl, 0.1 N
3.  6 ml de albúmina + 1.5 ml de pepsina + 4.5 ml de agua
4.  6 ml de albúmina + 1.5 ml de pepsina + 4.5 ml de HCl, 0.1 N

A continuación coloca los tubos a baño maría a 40 °C Algunos minutos mas tarde, únicamente en el tubo 4 se producirá un aclarado, esto es consecuencia de la actividad de la pepsina que, en medio ácido, ha hidrolizado a la albúmina.

Resultados:

Contenido del tubo	Reacción Biuret
albúmina+agua	No hubo aclarado
albúmina+agua+ácido clorhídrico	No hubo aclarado
albúmina+pepsina+agua	No hubo aclarado
albúmina+pepsina+ácido clorhídrico	Sí hubo un aclarado

Solo en en tubo que contiene la albúmina, pepsina,y ácido clorhídrico ocurre un aclarado lo que no indica que en este la coenzima (HCL) activo la enzima (pepsina), para que así, esta pueda actuar sobre la proteína ( en este caso albúmina)  y degradarla.

Análisis de resultados:

proteína	son macro-moléculas, formadas con cadenas de aminoácidos unidos mediante enlaces peptídicos
enlace peptídico	es un enlace entre el grupo amino (-NH2) de un aminoácido y el grupo carboxilo (-COOH) de otro aminoácido.
polipéptido	es un polímero formado por la unión de más de 10 aminoácidos.
aminoácido	son aquellos que forman la base de las proteínas, constituidos por un grupo amino y un grupo carboxilo.
digestión química	Es aquella en la que intervienen las enzimas para acelerar las reacciones químicas transformando las moléculas complejas en sencillas.
enzima activa	Es una enzima formada por una proteína y una coenzima.
enzima inactiva	son las que comúnmente contaminan a las enzimas activas.

Replanteamiento de la hipótesis:

La pepsina es una enzima que es producida por las moléculas del estómago, se encuentra en estado inactivo y necesita de una coenzima (ácido clorhídrico) para activarse para así poder actúar sobre las proteínas degradandolas, proporcionando polipéptidos.  

Conceptos clave:

Digestión de proteínas
pepsina
sitio de producción de pepsina en el aparato digestivo humano
sitio de hidrólisis total de las proteínas en el aparato digestivo humano

Relaciones:

Esta actividad de laboratorio coadyuva a la construcción del concepto de digestión química, en este caso, asociada con la degradación de las proteínas. Es importante relacionar los órganos donde se inicia y termina esta hidrólisis.

Discusión:

• En esta practica pudimos comprender como se lleva a cabo la degradación de las proteínas y la función que llevan a cabo las enzimas en nuestro aparato digestivo.
• Comprendimos la importancia  de la coenzima en este caso (ácido clorhídrico) para poder activar una enzima (la pepsina) para que pueda llevar a cabo la ruptura de enlaces peptídicos a nivel de aminoácidos.
• Tambien que la digestion total de las proteinas termina en el intestino delgado con accion de las proteasas(del jugo pancreatico) dando como resultado aminoacidos

Conclusión:

En ésta práctica pudimos comprender el papel que juega la coenzima para que la pepsina sea activada y pueda iniciar la ruptura de los enlaces peptídicos a nivel de los aminoácidos. La mayor parte de la digestión de proteínas se produce en el intestino delgado, donde los productos de la digestión gástrica son hidrolizados hasta aminoácidos primero por la acción de las enzimas proteolíticas del jugo pancreático y después por las enzimas asociadas a las células de las microvellosidades.


Referencias:

http://laguna.fmedic.unam.mx/~evazquez/0403/generalidades%20digestion%20proteinas.html

Programa de Biología III
PAPIME, UNAM
Paginas: 16 - 18, 25,26

http://www.profesorenlinea.cl/Ciencias/Proteinas_Digestion.html

Mapa Lectura 3

W de Gowin (Practica 2)

Practica 2 "Acción de la amilasa sobre el almidón"

UNIVERSIDAD NACIONAL AUTÓNOMA DE MÉXICO

COLEGIO DE CIENCIAS Y HUMANIDADES

PLANTEL SUR

PRACTICA 2

“ACCIÓN DE LA AMILASA SOBRE EL ALMIDÓN”

EQUIPO 3:

SERRATO MAGAÑA KARLA DENNISE

RUIZ TEMPLOS MARIANA

TERÁN HERNÁNDEZ PABLO ENRIQUE

PROFESORA: MARIA EUGENIA TOVAR

GRUPO:

528

Hipótesis:

El almidón es un polímero,formado por enlaces de amilasa y amilopectina.
En la practica se podrá identificar la presencia del almidón con ayuda del reactivo lugol que nos dará una solución en color morado.

La enzima de la amilasa va a hidrolizar al almidón rompiendo sus enlaces. Obteniendo glucosa.
Para poder identificar y comprobar que en verdad se rompieron tos enlaces usaremos el reactivo de benedict, el cual formara un precipitado color rojo ladrillo que permitirá identificar los azucares simples como la glucosa.

Preguntas generadoras :
¿Cómo actúa la amilasa sobre el almidón?

La amilasa en una ezima que va a actuar sobre el polisacarido almidón hidrolizando sus enlaces, hasta degradarlos en glucosa.

¿Como está formado el almidón químicamente?

esta formado por moleculas de amilasa y amilopectina unidos mediante enlaces O-glucosidicos

¿Que es la amilasa desde el punto de vista químico?

es la encargada de degradar y comenzar la digestión química de los alimentos.

¿Cuál es el papel que desempeña el almidón en los animales?

tiene una gran importancia en los animales ya que actúa como sustancia de reserva energética.

¿Por que es necesario para los animales que la amilasa actúe sobre el almidón?

por que al igual que en los seres humanos, actúa como lubricante y facilita la degradación del alimento.

Introducción:

Las enzimas son catalizadores proteicos que aceleran la velocidad de
las reacciones metabólicas que ocurren tanto a nivel celular como
fuera de ellas, sin sufrir ellas cambios en su estructura. Para el
proceso de digestión , las biomoléculas ingeridas en la dieta deben
ser degradadas a sus componentes más sencillos para ser absorbidas a
nivel del tubo digestivo y así llegar al lugar correspondiente a nivel
celular donde participarán en diversos procesos metabólicos
indispensables para el mantenimiento de una adecuada homeostasis.La
digestión de los carbohidratos comienza en la boca, donde los
alimentos se mezclan con la Amilasa salival que degrada los enlaces
del almidón liberándose Maltosa, Glucosa y dextrinas de almidón que
poseen todos los enlaces.La acción de las enzimas, por sus
características físico-químicas, pueden afectarse por la condiciones
presentes en el lugar de acción de éstas. Entre los principales
factores que pueden modificar la acción enzimática tenemos:
a. La temperatura:
Todas las enzimas muestran cierta termolabilidad, aunque para muchas
de ellas el aumento de la temperatura, hasta cierto límite, acelera la
velocidad de la reacción. Sin embargo, por que la mayoría de éstas son
estructuras proteicas , pueden ser desnaturalizadas a medida que se
aumenta la temperatura y así perder su actividad biológica. La
temperatura a la cual se observa la máxima actividad enzimática se
denomina Temperatura Óptima.
b. El pH:
Por su característica proteica, muchas enzimas por el pH de donde se
encuentran pueden cambiar desde un estado ionizado ( Con carga ) a uno
no ionizado ( sin carga), afectando así la actividad biológica de las
mismas.
Cada enzima posee un pH característico donde puede realizar su función
( pH óptimo), cualquier variación del mismo puede afectar la acción
enzimática y así afectar la velocidad de las reacciones químicas.
c. Inductores e inhibidores:

Existen sustancias químicas que pueden afectar la interacción del
sustrato y la enzima, ya sea aumentando la actividad enzimática
( Inductores ) o disminuyéndola ( Inhibidores).
Los inhibidores tienen gran utilidad en bioquímica, ya que ayudan a
determinar la especificidad de la enzima por el sustrato, la
naturaleza de los
grupos funcionales en el mantenimiento de la estructura activa de la
enzima. Estos compuestos no son alterados químicamente por la enzima.
De acuerdo al tipo de inhibición que ejerzan éstas sustancias, se han
clasificado en :
• Inhibidores Reversibles.
• Inhibidores Irreversibles

Objetivos:

• Identificar la acción de la amilasa de la saliva sobre el almidón
• identificar los productos de la acción de la amilasa sobre el almidón
• Caracterizar la digestión enzimática realizada por la secreción de las glándulas salivales

Material:

Papel filtro
Embudo
5 tubos de ensayo
2 goteros
2 cápsulas de porcelana

Material biológico:

Muestra de saliva

Sustancias:

Agua destilada
Almidón
Reactivo de Benedict
Reactivo de lugol para almidón

Equipo:

Balanza granataria electrónica
Parrilla con agitador magnético


Procedimiento:

A. Obtención de la enzima amilasa

Despues de enjuagar la boca, mastica un trozo de papel filtro para estimular la salivación. Los líquidos segregados se van pasando a un embudo que tenga un papel filtro, el filtrado se coloca en un tubo de ensayo hasta obtener 1 ml.
La saliva así obtenida se diluye empleando 1ml de saliva y 10 ml de agua destilada, así se obtiene la preparación de enzima base.
Se prepara una solución al 2% de almidón, para lo cual se pesan 2 g de almidón y se disuelven en 100 ml de agua destilada.
Se colocan 2 ml de agua destilada en un tubo de ensayo se le agregan 2 ml de la solución de almidón al 2% y 2 ml de la solución base de la enzima.
En otro tubo se colocan 2 ml de agua destilada y se le agregan 2 ml de la solución del almidón al 2%.
Los tubos se colocan en baño maria a 37° C, durante 15 minutos dejando que la amilasa vaya hidrolizando al almidón.
Una vez transcurridos los 15 minutos se sacarán los tubos del baño maria y se harán las pruebas del lugol y el benedict.

B. Reacciones del lugol para almidón y benedict

La prueba del yodo o el lugol permite identificar la presencia de almidón, con este reactivo se obtiene un color azul-violeta caracteristico.
Toma 1 ml de la disolución de cada uno de los tubos y añade unas gotas de lugol a cada una de ellas. Si no existe la hidrólisis del almidón la prueba será positiva.

La prueba de Benedict permite identificar a los azucares reductores.
Toma 1 ml de cada una de las disoluciones de los tubos y agrégales 1 ml del reactivo de Benedict, enseguida coloca ambos tubos en baño Maria, si existe hidrólisis del almidón se formará un precipitado rojo ladrillo que indica la presencia de azucares como la glucosa y la maltosa.

Resultados:

Contenido del tubo	Reacción del lugol	Reacción del Benedict
Amilasa+almidón+agua	negativa	positiva
Almidón+agua	positiva	negativa

Solo en el tubo que contiene la enzima base (amilasa), agua destilada y solución del almidón, y con la acción de la sustancia de Benedict, ocurrirá una reacción que nos indica que en esta hay presencia de azucares.

En cambio en el tubo que contiene solo agua destilada y solucion del almidón, y con ayuda del lugol.. todo la mezcla tomo un color azul, que nos indica que en esta hay presencia de almidón

Análisis de resultados:

enzima	es una proteína que permiten que se lleven a cabo todas las reacciones químicas acelerando dichas reacciones.
digestión química	Se lleva a cabo por las enzimas y estas hacen que las moléculas se transformen de complejas a simples.
digestión mecánica	Es la trituración del alimento por medio de la masticación con ayuda de los dientes.
degradación	Es la transformación de moléculas complejas a simples, con ayuda de enzimas que romperán los enlaces.
saliva	Es una sustancia liquida que humedece los alimentos para así facilitar la masticación
azúcares simples	están formados por un monosacarido, son de rápida absorción y digestión.
azúcares complejos	están compuestos por muchas moléculas de glucosa y tienen una digestión más lenta
polímeros	son moléculas complejas o macro moléculas  como las grasas, proteínas, ácidos nucleicos entre otros.
monómeros	son moléculas sencillas como el glicerol y ácidos grasos, aminoácidos, bases nitogenadas entre otros.

Replanteamiento de la hipótesis:

La amilasa es una enzima (producida por las glándulas salivales) que rompe los enlaces entre los azúcares que constituyen al almidón y finalmente después de su acción deja glucosa. El almidón se hidroliza por medio de la amilasa que se encuentra formando parte de la saliva y el jugo pancreático. Para poder identificar la presencia de almidón, la disolución tendrá que tornarse azúl intenso.

Conceptos clave:

Enzima, digestión, digestión química, digestión mecánica, degradación, secreciones de glándulas del aparato digestivo, reacciones químicas en el interior del cuerpo, azucares simples, azucares complejos, polímeros y monómeros.

Relaciones:

Este tema es importante porque permite observar en el laboratorio la acción de las secreciones de las glándulas salivales, las que llevan a cabo una digestión química de los polisacaridos, apoya a los estudiantes en la construcción del concepto de digestión química y permite comprender la función de algunas glándulas asociadas al aparato digestivo.

Discusión:

• En esta practica logramos identificar como una enzima actúa sobre el almidón, y nos ayuda a entender mejor como es que otras enzimas actuan en todo el aparato digestivo.
• La enzima de la amilasa va a hidrolizar al almidón rompiendo sus enlaces y en esta practica comprobamos que estos enlaces se rompieron y formaron glucosa.
• Pudimos identificar cómo es que la amilasa actuó sobre el almidón, también la presencia de éste y la de sus productos: la glucosa y maltosa.

Conclusión:

La amilasa es la enzima secretada por las glándulas salivales y la amilasa pancreática  (parótidas, submaxilares y sublinguales) encargada de romper los enlaces del almidón, formando glucosa y maltosa.
La ð-amilasa hidroliza al almidón en ð-maltosa; la enzima actúa primero solo sobre los extremos no reductores
La función de la amilasa consiste en degradar el almidón para  formar azúcares simples.
las enzimas  catalizadoras en ese caso la amilasa actúa sobre el polisacárido el  almidón, hidrolizando el enlace O-glicosídico, por lo que el almidón  se termina por transformar en unidades de glucosa.


Referencias:
http://dialnet.unirioja.es/servlet/articulo?codigo=2581978

http://mazinger.sisib.uchile.cl/repositorio/lb/ciencias_quimicas_y_farmaceuticas/schmidth02/parte07/01.html

http://html.rincondelvago.com/la-digestion.html

Programa de Biología III
PAPIME, UNAM
Paginas: 15- 16, 24